课题开题报告模板 生理条件下荷正电的多肽类药物口服给药生物利用度低

课题开题报告模板一、课题的目的及研究意义1、课题目的：本课题主要目的是解决生理条件下荷正电的多肽类药物口服给药生物利用度低的问题。穿膜肽（CPPs）是一种具有穿透细胞膜能力的短肽，因携带大量的正电荷，可通过静电相互作用与荷负电的多肽蛋白类药物自组装形成纳米粒，协助其穿过消化道上皮进入血液循环，但对于荷正电的生物大分子无吸收促进作用。本课题拟构建一种由CPPs介导的纳米递药系统，以乳酸-羟基乙酸共聚物(PLGA)为骨架材料，制备可生物降解纳米粒，通过表面修饰寡聚精氨酸赋予该纳米粒穿膜能力，用其包载多肽药物和荧光探针，以Caco-2细胞为体外模型，评价|CPPs的肽链长度和纳米载药系统的粒径对于多肽药物穿透生物膜能力的影响。2、研究意义： （1）这种新型的给药系统，其表面修饰的寡聚精氨酸可以提高荷正电多肽穿透消化道上皮进入血液循环的能力，使多肽药物经由口服途径给药可以到达所需的治疗浓度。用于包载药物的纳米粒、可以防止药物在消化道的分解，提高药物在消化道中的稳定性。因此，这种寡聚精氨酸修饰的纳米粒能够增加多肽口服给药的血药浓度，减少患者由于频繁静脉注射带来的痛苦。 （2）使用载体包载药物，可以减少穿膜肽直接与多肽药物结合产生的电荷损失，增强CPP携带药物穿透单层细胞的能力。因此，缩短肽链的CPP可能|具有与原长度CPP同样的生物活性，对于降低药物的毒副作用有着重要意义。二、课题研究状况  随着生物技术的发展，蛋白质多肽类药物在临床上的应用越来越广泛。多肽涉及人体的激素、神经、细胞生长和生殖等各个领域，可被广泛地应用于医疗、卫生、保健、食品、化妆品等方面。多肽类药物的主要特点是用量小，生物活性强，对癌症、自身免疫性疾病、记忆力减退、精神失常、高血压和某些心血管及代谢等疾病有显著的疗效和广泛的应用前途。常用的多肽|蛋白类药物因为具有以下特性，导致难以透过细胞膜进入血液：（1）人体消化道内存在多种降解多肽蛋白的酶，药物口服进入体内后易被分解。

1（2）多肽蛋白亲水性强，亲脂性弱，不易透过由脂质双分子层构成的细胞膜。（3）多肽蛋白类分子水化半径较大，无法通过自由扩散或膜通道等形式穿过细胞膜。  由于口服给药方式的多肽蛋白类药物无法入血，不能达到治疗剂量的血药浓度，故临床上一般常用剂型为注射剂或冻干粉针剂。以糖尿病为例，较为严重的病人一般一天要接受两至三次的注射，不仅患者的依从性差，也增加了药物的毒副作用。因此，相对于注射制剂，蛋白质多肽类药物的口服给药制剂更具优|越性，目前多肽类口服给药的研究方向主要集中在生物粘附，消化道蛋白酶抑制剂，吸收促进剂的开发等方面。近年来，一些具有细胞膜穿透能力的多肽，如TAT、MPG、PEP-1、penetratin、寡聚精氨酸等，由于它们具有能穿过细胞膜而保持其完好无损的特点而逐渐成为关注的焦点。此类天然或合成、具有水溶性、低裂解性并通过非吞噬作用进入各种细胞膜的多肽，称为穿膜肽(cell-permeable peptides, CPPs)。目前对穿膜肽的穿膜机制还不完全清楚。穿膜肽对生物大分子的转运效率高，不耗能，且基本无毒，其可以通过共价键或非共价键偶合等方式携带各种生物|大分子透过细胞膜，已经实验证实的这些大分子有基因、蛋白质和多肽，以及纳米颗粒和脂质体等。由于穿膜肽具有极佳的穿膜效率和较高的安全性，因此有望成为促进生物大分子药物口服吸收的有力工具。寡聚精氨酸、penetratin等CPPs已经在促进胰岛素的口服吸收研究中取得了显著效果。组成这些小分子穿膜肽的氨基酸大多是碱性氨基酸，携带有正电荷，通过与细胞表面的负电荷静电结合，可能引起胞吞作用和核小体蛋白的聚集，介导药物穿透细胞膜。目前已有文献报道，利用穿膜肽携带正电荷的特征，通过静电相互作用与荷负电的多肽蛋白类药物自组装形成纳米粒，协助其穿过消化道上皮进入血液循|环，但对于荷正电的生物大分子无吸收促进作用。本课题拟构建一种由CPPs介导的纳米递药系统，以乳酸-羟基乙酸共聚物(PLGA)为骨架材料，制备可生物降解纳米粒，打破CPPs只能携带荷负电大分子的局限性，通过表面修饰寡聚精氨酸赋予该纳米粒穿膜能力，用其包载多肽药物和荧光探针，以Caco-2细胞为体外模型，评价CPPs的肽链长度和纳米载药系统的粒径对于单层细胞穿透能力的影响。主要参考文献[1] Yoshio Hayashi, Kentaro Takayama, Yuka Suehisa,et al. Development of oligoarginin|e-drug conjugates linked to new peptidic self-cleavable spacers toward effective intestinal absorption [J]. Bioorganic&Medicinal Chemistry Letters . 2007; 17: 5129–5132[2] Sonali B. Fonseca, Mark P. Pereira, Shana O. Kelley. Recent advances in the use of cell-penetrating pepti|des for medical and biological applications [J]. Advanced Drug Delivery Reviews. 2009; 61: 953–964

2[3] Noriyasu Kamei, Mariko Morishita, Yoshimi Eda et al. Usefulness of cell-penetrating peptides to improve intestinal insulin absorption [J]. Journal of Controlled Release. 200|8; 132: